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elisa试剂盒如何使用?

发布时间:2021-12-15 阅读:598次
elisa试剂盒如何使用?下面由无锡生物科技来给大家介绍下。ELISA试剂盒的基础是抗原或抗体的固相和抗原或抗体的酶标记。结合到固相载体表面的抗原或抗体仍然保持其免疫活性,并且酶标记的抗原或抗体同时保持其免疫活性和酶活性。在测定过程中,受试样品(测定抗体或抗原)与固体载体表面上的抗原或抗体反应。
 
ELISA试剂盒通过洗涤将固体载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分离。然后添加酶标记的抗原或抗体,并通过反应将其结合到固相载体上。此时,固相上的酶量与样品中被测物质的量成一定比例。加入酶反应底物后,酶催化底物生成有色产物。产品的数量与样品中被测物质的数量直接相关,因此可以根据颜色深度进行定性或定量分析。由于酶的高催化效率,间接放大了免疫反应的结果,使测定方法达到了高灵敏度。ELISA试剂盒可用于抗原和抗体的检测。
 
使用方法步骤:
 
1、血清:手术中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。采血后,1000×G离心10分钟,快速细致分离红细胞。
 
2、血浆:EDTA、枸橼酸盐和肝素血浆可用于检测。1000×G离心30分钟,以去除颗粒。
 
3、细胞上清液:1000×G离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。
 
4、组织匀浆:用适量生理盐水捣碎组织。1000×G离心10分钟,取上清液。
 
5、保存:如果不立即使用样品,应将其分成小块,并在-70℃下保存,以避免重复冷冻。尽量不要使用溶血性或高脂血症血液。如果血清中有大量颗粒,则在检测前应使用离心机或过滤器。不要在37℃或更高温度下加热和解冻。在室温下解冻,并确保样品均匀冷冻。
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