牛ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA。所提供的ELISA试剂盒是典型的夹心ELISA试剂盒。预包被抗体为抗牛IFN-γ单克隆抗体。检测阶段抗体是通过生物素（biotin）标记的多克隆抗体。将样品和生物素标记抗体依次加入酶标记板孔中反应，然后用PBS或TBS洗涤。然后，加入过氧化物酶标记的亲和素反应；在用PBS或TBS彻底清洗后，基板TMB用于显色。TMB在过氧化物酶的催化下变成蓝色，在酸的作用下变成最终的黄色。样本因子中的颜色深度和待测颜色呈正相关。